เครื่องอ่านไมโครเพลท ELISA คืออะไร?
เครื่องอ่านไมโครเพลท กล่าวคือ การทดสอบอิมมูโนดูดซับที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ เป็นเครื่องมือพิเศษสำหรับการทดสอบอิมมูโนดูดซับที่เชื่อมโยงกับเอนไซม์ ในความเป็นจริง มันเป็นโฟโตอิเล็กทริกคัลเลอริมิเตอร์พิเศษหรือสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ปลอมตัว และหลักการทำงานพื้นฐานของมันก็เหมือนกับโครงสร้างหลักและโฟโตอิเล็กทริกคัลเลอริมิเตอร์ สามารถแบ่งออกเป็นสองประเภทง่ายๆ แบบกึ่งอัตโนมัติและแบบอัตโนมัติทั้งหมด แต่หลักการทำงานโดยทั่วไปจะเหมือนกัน แก่นของมันคือคัลเลอริมิเตอร์นั่นคือวิธีการคัลเลอริเมตริกใช้ในการวิเคราะห์เนื้อหาของแอนติเจนหรือแอนติบอดี การวัดค่า ELISA โดยทั่วไปต้องใช้ปริมาตรสุดท้ายของสารละลายทดสอบน้อยกว่า 250μL และการทดสอบไม่สามารถเสร็จสิ้นด้วยโฟโตอิเล็กทริกคัลเลอริมิเตอร์ทั่วไป ดังนั้นจึงมีข้อกำหนดพิเศษสำหรับโฟโตอิเล็กทริกคัลเลอริมิเตอร์ในตัวอ่านไมโครเพลท
หลักการ
ที่จริงแล้ว เครื่องอ่านไมโครเพลทนั้นเป็นโฟโตอิเล็กทริกคัลเลอริมิเตอร์หรือสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ที่อำพรางวัตถุประสงค์พิเศษ และหลักการทำงานพื้นฐานของมันก็เหมือนกับโครงสร้างหลักและโฟโตอิเล็กทริกคัลเลอริมิเตอร์ รูปภาพแสดงการทำงานของเครื่องอ่านไมโครเพลทสุ่มตัวอย่างอัตโนมัติช่องสัญญาณเดียว แผนภาพ. คลื่นแสงที่ปล่อยออกมาจากหลอดไฟแหล่งกำเนิดแสงจะเปลี่ยนเป็นแสงสีเดียวโดยตัวกรองหรือโมโนโครเมเตอร์ และเข้าสู่ชิ้นงานทดสอบที่ทดสอบในขั้วไมโครพรุนพลาสติก ส่วนหนึ่งของแสงเอกรงค์จะถูกดูดซับโดยชิ้นงานทดสอบ และอีกส่วนหนึ่งจะถูกส่งผ่านชิ้นงานทดสอบที่ส่องสว่างไปยังเครื่องตรวจจับแสง เครื่องตรวจวัดแสงจะแปลงสัญญาณแสงต่างๆ ของชิ้นงานทดสอบเพื่อทดสอบเป็นสัญญาณไฟฟ้าที่สอดคล้องกัน สัญญาณไฟฟ้าถูกประมวลผลโดยการขยายสัญญาณล่วงหน้า การขยายสัญญาณลอการิทึม และการแปลงแอนะล็อกเป็นดิจิทัล ป้อนไมโครโปรเซสเซอร์สำหรับการประมวลผลข้อมูลและการคำนวณ และสุดท้ายแสดงผลโดยจอแสดงผลและเครื่องพิมพ์ ไมโครโปรเซสเซอร์ยังควบคุมการเคลื่อนที่ของกลไกขับเคลื่อนเชิงกลในทิศทาง X และทิศทาง Y เพื่อย้ายไมโครเพลทผ่านวงจรควบคุม เพื่อให้ตระหนักถึงกระบวนการตรวจจับตัวอย่างอัตโนมัติ เครื่องอ่านไมโครเพลทอื่นๆ ใช้การเคลื่อนที่แบบแมนนวลของไมโครเพลทในการตรวจจับ ดังนั้นจึงละเว้นกลไกการขับเคลื่อนเชิงกลและวงจรควบคุมในทิศทาง X และ Y เพื่อให้เครื่องมือมีขนาดเล็กลงและโครงสร้างเรียบง่ายขึ้น
ไมโครเพลทเป็นแผ่นพลาสติกใสที่ใช้สำหรับวางตัวอย่างโดยเฉพาะเพื่อทดสอบ จานมีรูเล็กๆ หลายแถวที่มีขนาดเท่ากัน และแอนติเจนหรือแอนติบอดีที่เกี่ยวข้องจะฝังอยู่ในรู รูเล็กๆ แต่ละรูสามารถบรรจุสารละลายได้สองสามสิบมิลลิลิตร
แสงเป็นคลื่นแม่เหล็กไฟฟ้า ความยาวคลื่นของ 100nm-400nm เรียกว่าแสงอัลตราไวโอเลต สายตามนุษย์สามารถมองเห็นแสงระหว่าง 400nm ถึง 780nm และความยาวคลื่นที่มากกว่า 780nm เรียกว่าแสงอินฟราเรด ผู้คนสามารถมองเห็นสีได้เพียงเพราะแสงตกกระทบวัตถุและสะท้อนกลับโดยวัตถุ พืชสีเขียวเป็นสีเขียว เนื่องจากพืชส่วนใหญ่ดูดซับแสงสีส้ม-แดง และแสงสีฟ้า-ม่วง แต่ไม่ดูดซับและสะท้อนแสงสีเขียว พืชจึงปรากฏเป็นสีเขียว หลักการของการวัดค่าไมโครเพลทรีดเดอร์คือการตรวจจับการดูดกลืนแสงของสารที่วิเคราะห์ที่ความยาวคลื่นจำเพาะ
โครงสร้าง
มีจาน 40 หลุม จาน 55 หลุม แผ่น 96 หลุม และอื่นๆ เครื่องมือต่างๆ ใช้แผ่นปากที่แตกต่างกันซึ่งสามารถทดสอบได้ทีละรายการหรือทีละแถว
สามารถรับแสงสีเดียวที่ใช้โดยเครื่องอ่านไมโครเพลทได้ผ่านฟิลเตอร์ที่สอดคล้องกันหรือโมโนโครเมเตอร์เดียวกันกับสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ เมื่อใช้ฟิลเตอร์เป็นอุปกรณ์กรอง จะเหมือนกับคัลเลอริมิเตอร์ทั่วไป สามารถวางไว้ด้านหน้าไมโครเพลทหรือด้านหลังไมโครเพลทได้ หลังจากที่คอนเดนเซอร์ ไดอะแฟรมไปถึงรีเฟลกเตอร์ ไดอะแฟรมจะสะท้อนโดยรีเฟลกเตอร์ที่ 90° และผ่านสารละลายคัลเลอริเมตริกในแนวตั้ง แล้วส่งผ่านฟิลเตอร์ ไปที่ตาแมว
จากแผนภาพบล็อกการทำงานและแผนภาพเส้นทางแสงของเครื่องอ่านไมโครเพลท จะเห็นได้ว่ามีความแตกต่างดังต่อไปนี้กับโฟโตอิเล็กทริกคัลเลอริมิเตอร์ทั่วไป:
(L) ภาชนะสำหรับสารละลายคัลเลอริเมตริกที่จะทดสอบไม่ได้ใช้คิวเวตต์อีกต่อไป แต่ใช้ไมโครเพลทพลาสติก ไมโครเพลทมักจะทำจากวัสดุโพลีเอทิลีนโปร่งใส ซึ่งมีผลการดูดซับที่แข็งแกร่งต่อแอนติเจนและแอนติบอดี ดังนั้นจึงใช้ไมโครเพลททำหน้าที่เป็นพาหะของเฟสของแข็ง
⑵เนื่องจากไมโครเพลทพลาสติกที่บรรจุตัวอย่างเป็นรูพรุนหลายแถว แสงสามารถผ่านในแนวตั้งได้เท่านั้น ดังนั้นลำแสงของเครื่องอ่านไมโครเพลทจะผ่านสารละลายที่จะทดสอบและไมโครเพลทในแนวตั้ง ลำแสงสามารถจากบนลงล่างหรือสามารถผ่านของเหลวสีจากล่างขึ้นบนได้
⑶ เครื่องอ่านไมโครเพลทมักจะไม่เพียงแค่ใช้ A เท่านั้น แต่บางครั้งก็ใช้ OD ความหนาแน่นเชิงแสงเพื่อแสดงการดูดกลืนแสงด้วย เครื่องอ่านไมโครเพลทสามารถแบ่งออกเป็นสองประเภท: ช่องทางเดียวและหลายช่องทาง และช่องทางเดียวแบ่งออกเป็นสองประเภท: อัตโนมัติและด้วยตนเอง ประเภทของเครื่องมืออัตโนมัติ มีกลไกการขับเคลื่อนแบบกลไกในทิศทาง X และ Y ซึ่งสามารถส่งรูเล็กๆ ของไมโครเพลท L ทีละช่องใต้ลำแสงเพื่อทำการทดสอบ และแบบแมนนวลจะใช้การเคลื่อนที่แบบแมนนวลของไมโครเพลทสำหรับการวัด
เครื่องอ่านไมโครเพลทแบบหลายช่องสัญญาณได้รับการพัฒนาบนพื้นฐานของเครื่องอ่านไมโครเพลทช่องทางเดียว เครื่องอ่านไมโครเพลทประเภทนี้โดยทั่วไปเป็นแบบอัตโนมัติ ไม่มีลำแสงหลายตัวและตัวตรวจจับแสงหลายตัว เช่น เครื่องมือ 12 ช่องสัญญาณที่มีลำแสง 12 ตัวหรือแหล่งกำเนิดแสง 12 ตัว ตัวตรวจจับ 12 ตัวและตัวขยายสัญญาณ 12 ตัว ภายใต้การทำงานของอุปกรณ์ขับเคลื่อนกลไกในทิศทาง X จะตรวจพบตัวอย่าง 12 ตัวอย่างใน แถว. ความเร็วในการตรวจจับของเครื่องอ่านไมโครเพลทแบบหลายช่องสัญญาณนั้นรวดเร็ว แต่โครงสร้างของมัน ราคาที่ซับซ้อนมากขึ้นก็สูงขึ้นเช่นกัน
ช่วงการใช้งานของเครื่องอ่านไมโครเพลท
การทดสอบทางโลหิตวิทยา การทดสอบแอนติบอดีที่เกี่ยวข้องกับเกล็ดเลือด PAIgA, PAIgG, PAIgM
ความมุ่งมั่นของ D-Dimer D-Dimer
การหาค่าซีรัมไฟบรินผลิตภัณฑ์ย่อยสลาย FDP
การหาค่า T3, T4 ด้วยไตรไอโอโดไทโรนีนและเตตระไอโอโดไทโรนีน
การทดสอบทางภูมิคุ้มกัน การหาโปรตีน C-reactive CRP
ความมุ่งมั่นของอิมมูโนโกลบูลิน IgD, IgE
ความมุ่งมั่นของการไหลเวียนของภูมิคุ้มกันคอมเพล็กซ์CIC
การหาค่าปัจจัยไขข้อรูมาตอยด์ IgG, IgA, IgM RF
แอนติบอดีต้านไทโรโกลบูลิน, การตรวจไมโครโซมอลแอนติบอดี TG, TM
การตรวจหาภูมิคุ้มกันของมะเร็งเนื้องอก
การตรวจหาสารก่อมะเร็งแอนติเจน CEA
การหา PSA แอนติเจนจำเพาะต่อมลูกหมาก
การตรวจหามะเร็งตับอ่อน มะเร็งทางเดินน้ำดี มะเร็งกระเพาะอาหาร CA19-9
การตรวจหามะเร็งรังไข่ CA125
การตรวจหามะเร็งเต้านม CA15-3
การตรวจหามะเร็งปากมดลูกชนิด squamous cell carcinoma SCC
การตรวจหามะเร็งไขกระดูกหลายชนิด
การตรวจหามะเร็งต่อมไทรอยด์ hTG
การทดสอบภูมิคุ้มกันของโรคติดเชื้อ, การทดสอบทางซีรั่มของไวรัสตับอักเสบเอ, การต่อต้าน HAV-IgM
การทดสอบทางซีรั่มไวรัสตับอักเสบบี 2 คู่ครึ่ง
การตรวจหาซีรั่มไวรัสตับอักเสบซี
การตรวจหาซีรั่มวิทยาของไวรัสตับอักเสบดี Anti-HDV-IgG, anti-HDV-IgM
การตรวจหาซีรั่มวิทยาของไวรัสตับอักเสบอี Anti-HEV-IgG
การตรวจหาแอนติบอดีต่อโรคไข้เลือดออกที่มีอาการไต HFRS-IgG
การตรวจหาแอนติบอดีไวรัสไข้สมองอักเสบญี่ปุ่น IgM
การตรวจหาแอนติบอดีไวรัสภูมิคุ้มกันบกพร่องของมนุษย์ (เช่น AIDS ในระดับภูมิภาค) HIV β 2 M
การทดสอบการทำงานของการดูแลก่อนคลอดและหลังคลอด การทดสอบไวรัส Toxoplasma TOXO
การตรวจหาไวรัสหัดเยอรมัน RV
การตรวจจับ Cytomegalovirus CMV
การตรวจหาไวรัสเริมชนิด Anti-HSV (Ⅰ, Ⅱ)
คนอื่นๆ สามารถทำการทดสอบทางพันธุกรรมและสารตกค้างของสัตว์ รายการตรวจสอบสารกำจัดศัตรูพืชตกค้าง ฯลฯ
